抑菌圈法 | 動物用藥查詢網
3種方法獲得的抑菌圈其形狀均比較理想,抑菌圈直徑大小分別是:K-B法16.84mm、牛津杯法18.36mm、打孔法22.58mm。對於K-B法,其操作簡單、方便快捷,被研究者廣泛利用, ...
目前抑菌圈研究法中使用最多的主要有K-B法(Kirby-Bauer test)、牛津杯法[1]和打孔法三種。K-B法即濾紙片法,選用質地均勻的濾紙,用打孔機打成直徑相同的圓片,滅菌後烘乾,浸泡於待測樣品中,然後置於試驗平板中培養一段時間後測定抑菌圈大小的一種方法。牛津杯法又稱杯碟法,將已滅菌的牛津杯置於試驗平板中,往杯中注入一定量的待測樣品,培養一段時間後測定抑菌圈大小的一種方法。打孔法,是指用已滅菌的打孔器或鋼管在試驗平板上打孔,往孔中注入一定量的待測樣品,培養一段時間後測定抑菌圈大小的一種方法。1、主要器皿及用品 培養皿(直徑90 mm)、打孔器(孔徑6 mm)、牛津杯(內徑6 mm)、不鏽鋼圓管(外徑6 mm)、濾紙、三角瓶(250 mL)。
2、培養基[2] 液體培養基:蛋白腖10 g/L,酵母粉5 g/L,NaCl10 g/L,pH 7.8。 平板培養基:蛋白腖10 g/L,酵母粉5 g/L,NaCl10 g/L,瓊脂粉20 g/L,pH 7.8。 3、 方法 菌種的活化及菌液的製備:將冷凍保存的菌種劃線接種至平板培養基,37℃培養24 h;挑單菌落接種至100 mL液體培養基,37℃、200 r/min搖床培養過夜,菌液備用。 試驗平板的製備:塗布平板法:先往已滅菌的平板中傾注20 mL左右平板培養基,水平靜置凝固,接種0.1 mL菌液,塗布均勻後備用。 傾注平板法:先往已滅菌的平板中接種1 mL菌液,然後傾注約20 mL已冷卻至50 ℃左右的平板培養基,混合均勻,水平靜置凝固後備用。 預加菌液傾注平板法:往已冷卻至50 ℃左右的平板培養基中注入一定量的菌液,混合均勻,傾注平板(約20 mL/平板),水平靜置凝固後備用。
目前流行的試驗平板製備方法主要有3個:①塗布平板法、②傾注平板和③預加菌液傾注平板法。 方法①獲得的試驗平板其抑菌圈清晰,但菌體生長不夠均勻,重複性較差,效果一般;方法②和方法③獲得的試驗平板其抑菌圈清晰,菌體生長均勻,重複性好,效果好。綜合試驗過程的各步驟細節,方法①導致菌體生長不均勻的原因可能是塗布...
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